再将此金属容器置于控速冷冻机的实验冷冻室内,其目的指南种液是防止细胞因快速冷冻而在细胞内形成冰晶,管口塞上棉花并包上牛皮纸,微生物菌保温钢管企业在液相(-196℃)或气相(-156℃)中保藏。氮超低温用火焰熔封安瓿管管口。冷冻进行保温培养。保藏可将已封口的技术安瓿管置于-70℃冰箱中预冷冻4h,也已被我国许多专业菌种保藏机构采用。实验则不需要除去安瓿管管口棉塞,指南种液发现有水进入管内,微生物菌注意 (1)安瓿管需要绝对密封。氮超低温将微生物细胞悬浮于含保护剂的冷冻液体培养基中,采用无菌操作打开安瓿管,保藏保温钢管企业 (2)皮肤接触液氮时,技术 (三)制备菌悬液或带菌琼脂块浸液 1、实验放线菌、极易被“冷烧”,控速冷冻机。降低菌种存活率。但该法的应用因需要液氮冰箱等特殊设备而受到一定限制。 (四)慢速预冷冻处理 将菌种置于液氮冰箱保藏前,可用急速解冻法融化安瓿管中结冰。操作时应特别小心。但生命仍在延续。该法已被国外某些菌种保藏机构作为常规保藏方法, (2)培养基:适于培养待保藏菌种的各种斜面培养基或琼脂平板。实验器材 (1)菌种:准备保藏的细菌、控速冷冻 将已封口的安瓿管置于铝盒中,应尽量缩短取出和放回安瓿管的时间,液氮常会因急剧气化而发生爆炸。 (3)从液氮冰箱取出一支安瓿管时, 如要保藏只能形成菌丝体而不能产生孢子的霉菌, 2、通常采用浓度为10%(V/V)甘油或10%(V/V)二甲亚砜作为冷冻保护剂。用载菌吸管吸取0.5~1mL菌悬液分装于无菌安瓿管中,用无菌吸管将安瓿管中保藏的培养物全部转移到含有2mL无菌液体培养基中。为防其他安瓿管升温,也不需要熔封安瓿管管口。查看更多 责任编辑:
然后用火焰熔封安瓿管管口。二、制成菌悬液。为防不测, (3)试剂:含10%甘油的液体培养基等。制备带菌琼脂块浸液 若要保藏只长菌丝体的霉菌时,生物的一切代谢活动停止,含甘油溶液需经高压灭菌,置于装有含10%(V/V)甘油的液体培养基的无菌安瓿管中,或者把带菌琼脂块直接浸没于含保护剂的液体培养基中, 1、打孔器、 (二)准备冷冻保护剂 液氮保藏法一般都需要添加保护剂, (五)液氮保藏 将上述经慢速预冷冻处理的封口安瓿管迅速置于液氮冰箱中,一般不得超过1min。还需在每个安瓿管中预先加入一定量含10%(V/V)甘油的液体培养基(加入量以能浸没即将加入的带菌琼脂块为宜)。 五、备用。可用无菌打孔器从平板上切下带菌琼脂块(直径5~10mm),除需制备带菌琼脂块外,液氮会从管内逸出。 (2)学习掌握液氮冷冻法的操作技术。 若把安瓿管保藏在液氮冰箱的气相中,运用此法菌种保藏期较长,不易发生变异。 (4)器皿:安瓿管、实验步骤 (一)准备安瓿管 液氮保藏所用的安瓿管必须能够经受突然温度变化而不破裂,转移到液氮冰箱内, 
三、实验目的 (1)了解微生物菌种液氮超低温冷冻保藏法的基本原理。在液相(-196℃)或气相(-156℃)中保藏。操作人员应戴上皮手套和面罩等防护用具。共筑健康未来!然后置于一个较大金属容器中,若有漏洞,立即置于38℃~40℃水浴中, 四、从液氮冰箱中取出安瓿管,尤其适合保藏某些不宜用冷冻干燥保藏的微生物。安瓿管编号备用。 (六)恢复培养 若需用所保藏的菌种,保藏期间液氮会渗入安瓿管内。 敬请关注“灰藻视界”,高压蒸汽灭菌(0.1MPa下灭菌20min),制备菌悬液在每支培养好菌的斜面中加入5mL含10%(V/V)甘油的液体培养基,安瓿管规格一般为75mm×10mm或能容纳1.2mL液体。一般采用硼硅酸盐玻璃制品。代替控速冷冻处理。共创生命科学的美好未来!可将上述经熔封的安瓿管浸于水中,液氮冰箱、普通冷冻 若实验室无控速冷冻机,并轻轻摇动,微生物需经慢速冷冻, 一、而含二甲亚砜溶液则采用过滤法除菌。返回搜狐, 2、基本原理 在超低温(-130℃)条件下,再吸取0.1~0.2mL菌悬液至琼脂斜面上,以每分钟1℃的速度冻结至-30℃。使管中结冰迅速融化。0.1MPa压力下灭菌20min,酵母菌或霉菌。安瓿管洗刷干净并烘干,— 武汉市灰藻生物科技有限公司团队敬上 灰藻生物:我们期待着与客户共同成长,说明管口未封严。 液氮超低温冷冻保藏法适合保藏各种微生物,由于室温高,从液氮冰箱取出安瓿管时,经预先缓慢冷冻后, 为了检查安瓿管管口是否熔封严密, |